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小反刍兽疫病毒竞争ELISA抗体检测试剂盒说明书

上市日期: 2017-09-04

【作用与用途】 用于检测绵羊、山羊血清或血浆中小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体。


小反刍兽疫病毒竞争ELISA抗体检测试剂盒说明书

兽用

兽药名称

通用名称:小反刍兽疫病毒竞争ELISA抗体检测试剂盒

商品名称:无

英文名称:Competitive ELISA Kit for Detecting Antibody of Peste des Petits Ruminants Virus

汉语拼音:Xiaofanchushouyi Bingdu Jingzheng ELISA Kangti Jiance Shijihe

【主要成分与含量】

编号

试剂盒组分

数量

用法

1P

2P

5P

PPRV C-I

PPRV C抗原包被板

96孔板×1

96孔板×2

96孔板×5

直接使用

PPRV C-II

样品稀释液

7ml×1

14ml×1

35ml×1

直接使用

PPRV C-III

PPRV阴性血清

100μl×1

200μl×1

500μl×1

直接使用

PPRV C-IV

PPRV阳性血清

100μl×1

200μl×1

500μl×1

直接使用

PPRV C-V

洗涤液20×

12ml×1

24ml×1

60ml×1

20倍稀释后使用

PPRV C-VI

酶标抗体

1ml×1

1ml×2

5ml×1

5倍稀释后使用

PPRV C-VII

吐温-20

120μl×1

240μl×1

600μl×1

直接使用

PPRV C-VIII

底物溶液

5ml×1

10ml×1

25ml×1

直接使用

PPRV C-IX

终止液

5ml×1

10ml×1

25ml×1

直接使用

【作用与用途】用于检测绵羊、山羊血清或血浆中小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体。

【用法与判定】

1、实验准备:试剂盒各个组分在使用前均须恢复至室温(20~25℃),加液前充分摇匀。

2、操作步骤

PPRV C抗原包被板(I)上PPRV阴性血清(III)、PPRV阳性血清(IV)、样品稀释液(II)和样品的分布如图NPCmS所示


1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

N

S5











B

N












C

P












D

P












E

S1












F

S2












G

S3












H

S4












1)在A1B1孔加入PPRV阴性血清(III)各50μl

2)在C1D1孔加入PPRV阳性血清(IV)各50μl

3)在E1F1孔加入样品稀释液(II)各50μl

4)剩余孔加入25μl样品稀释液(II),然后加入25μl样品用于检测;

5)轻轻振匀孔中样品(勿溢出),37℃孵育60分钟;

6)将洗涤液20×V)用纯水或去离子水做20倍稀释,再按0.5‰比例加入吐温-20VII),即为工作浓度的洗涤液

7)甩干PPRV C抗原包被板孔中的液体,每孔加入300μl洗涤液,洗涤4次,在洗涤和加入下一个试剂前,避免孔壁变干;

8)将酶标抗体VI)用样品稀释液(II)做5倍稀释,即为工作浓度的酶标抗体;每孔加入50μl的酶标抗体

937℃孵育30分钟;

10)甩干PPRV C抗原包被板孔中的液体,每孔加入300μl洗涤液,洗涤4次,在洗涤和加入下一个试剂前,避免孔壁变干;

11)每孔加入50μl底物溶液(VIII);

12)室温下避光孵育15分钟;

13)每孔加入50μl的终止液(IX)终止显色反应;

14)使用酶标仪测定450nm波长处的OD值。

3、结果判定

1PPRV阴性血清(III)的平均OD值即ODNCPPRV阳性血清(IV)的平均OD值即ODPC;酶标抗体平均OD值即ODCm;样品的OD值即ODS

2)按照以下方法计算抑制率PI

阳性血清抑制率即PIPC

PIPC=100-

ODPC

×100

ODCm

阴性血清抑制率即PINC

PINC=100-

ODNC

×100

ODCm

样品抑制率即PIS

PIS=100-

ODS

×100

ODCm

3)根据抑制率判定检验结果,PIPC>60PINC<40,试验结果有效;否则重新进行试验;PIS>50,结果为阳性;PIS≤50,结果为阴性。

【注意事项】

1)需自备的试验用器材:96孔板、100μl200μl的单道或多道微量移液器,吸头,酶标仪,纯水或去离子水。

2)底物溶液(VIII)避免接触氧化物,出现颜色变化,应弃之不用,应避光保存。

3)终止液(IX)为稀硫酸溶液,避免接触氧化物,若接触到皮肤或眼睛,请及时用大量清水洗涤并就医。

4)需稀释的组分洗涤液20×V)在稀释时应准确量取,如果发现有结晶应加热使其溶解后使用。

5)在操作过程中,尽量避免将气泡加入检测孔中。

【规格】  196/ 2192/ 3480/

【贮藏与有效期】  2~8℃保存,有效期12个月。

【生产企业】

企业名称:青岛立见诊断技术发展中心

企业地址:青岛市城阳区红岛街道岙东南路21

邮编:266114

电话:0532-87839766

传真:0532-87839766

 

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