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猪圆环病毒2型间接ELISA抗体检测试剂盒

上市日期: 2017-06-28

【作用与用途】 用于检测猪血清或血浆中猪圆环病毒2型(PCV2)抗体。

 

猪圆环病毒2型间接ELISA抗体检测试剂盒说明书

兽用

兽药名称

通用名称:猪圆环病毒2型间接ELISA抗体检测试剂盒

商品名称:无

英文名称:Indirect ELISA Kit for Detecting Antibody of Porcine Circovirus Virus type 2

汉语拼音:Zhuyuanhuanbingdu2xing JianjieELISA Kangti Jiance Shijihe

【主要成分与含量】

编号

试剂盒组分

数量

用法

1P

2P

5P

PCV2 I-I

PCV2 I抗原包被板

96孔板×1

96孔板×2

96孔板×5

直接使用

PCV2 I-II

样品稀释液

10ml×1

20ml×1

50ml×1

直接使用

PCV2 I-III

PCV2阴性血清

500μl×1

1 ml×1

2 ml×1

直接使用

PCV2 I-IV

PCV2阳性血清

500μl×1

1 ml×1

2 ml×1

直接使用

WB-V

洗涤液20×

30ml×1

30ml×1

100ml×1

20倍稀释后使用

PCV2 I-VI

酶标抗体

10ml×1

20ml×1

50ml×1

直接使用

CA-VII

底物溶液A

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

CB-VIII

底物溶液B

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

SS-IX

终止液

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

【作用与用途】用于检测猪血清或血浆中猪圆环病毒2型(PCV2)抗体。

【用法与判定】

1、实验准备

1)为保证不同样品的孵育时间一致,可先取待检样品不低于5μlPCV2阴性血清(III)、PCV2阳性血清(IV)不低于100μl分别加入96孔板(单独准备)中并做好记录,然后用多道移液器移至PCV2 I抗原包被板(I)相应孔中。也可在PCV2 I抗原包被板(I)直接加样。

2)试剂盒各个组分在使用前均须恢复至室温(20~25℃),加液前充分摇匀。

2、操作步骤

PCV2 I抗原包被板(I)上PCV2阴性血清(III)、PCV2阳性血清(IV)和样品的分布如图NPS所示


1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

N

S5











B

N












C

P












D

P












E

S1












F

S2












G

S3












H

S4












1)每孔加入95μl样品稀释液(II),A1B1C1D1孔不加样品稀释液(II);

2)在A1B1孔加入PCV2阴性血清(III)各100μl

3)在C1D1孔加入PCV2阳性血清(IV)各100μl

4)剩余孔加入5μl样品用于检测;

5)轻轻振匀孔中样品(勿溢出),37℃孵育30分钟;

6)将洗涤液20×V)用纯水或去离子水做20倍稀释,即为工作浓度的洗涤液

7)甩干PCV2 I抗原包被板孔中的液体,每孔加入300μl洗涤液,洗涤3次,在洗涤和加入下一个试剂前,避免孔壁变干;

8)每孔加入100μl的酶标抗体(VI);

937℃孵育30分钟;

10)甩干PCV2  I抗原包被板孔中的液体,每孔加入300μl洗涤液,洗涤3次,在洗涤和加入下一个试剂前,避免孔壁变干;

11)每孔加入50μl底物溶液AVII);

12)每孔再加入50μl底物溶液BVIII);

1337避光孵育10分钟;

14)每孔加入50μl的终止液(IX)终止显色反应;

15)使用酶标仪测定450nm波长处的OD值。

3、结果判定

1PCV2阴性血清(III)的平均OD值即ODNC应≤0.3PCV2阳性血清(IV)的平均OD值即ODPC应≥0.6,试验结果有效;否则重新进行试验;

2)样品的OD值即ODS

3)阈值计算:SP=ODS-ODNC

4SP值≤0.2,结果判为阴性;SP值>0.2,结果判为阳性。

【注意事项】

1)需自备的试验用器材:96孔板、100μl200μl的单道或多道微量移液器,吸头,酶标仪,纯水或去离子水。

2)底物溶液AVII)和底物溶液BVIII)避免接触氧化物,出现颜色变化,应弃之不用,底物溶液BVIII)应避光保存。

3)终止液(IX)为稀硫酸溶液,避免接触氧化物,若接触到皮肤或眼睛,请及时用大量清水洗涤并就医。

4)需稀释的组分洗涤液20×V)在稀释时应准确量取,如果发现有结晶应加热使其溶解后使用。

5)在操作过程中,尽量避免将气泡加入检测孔中。

【规格】  196/ 2192/ 3480/

【贮藏与有效期】  2~8℃保存,有效期12个月。

【生产企业】

企业名称:青岛立见诊断技术发展中心

企业地址:青岛市城阳区红岛街道岙东南路21

邮编:266114

电话:0532-87839766

传真:0532-87839766

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