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口蹄疫3ABC抗体竞争ELISA检测试剂盒

上市日期: 2017-06-28

【作用与用途】 用于检测猪、牛、羊等动物血清或血浆中口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3ABC抗体,用于区分免疫和感染。


 

口蹄疫3ABC抗体竞争ELISA检测试剂盒说明书

兽用

兽药名称

通用名称:口蹄疫3ABC抗体竞争ELISA检测试剂盒

商品名称:无

英文名称:CompetitiveELISA Kit for Detecting 3ABC Antibody of FMDV

汉语拼音:Koutiyi 3ABC KangtiJingzhengELISAJianceshijihe

【主要成分与含量】

编号

试剂盒组分

数量

用法

1P

2P

5P

FMDV 3ABCC-I

FMDV 3ABCC抗原包被板

96孔板×1

96孔板×2

96孔板×5

直接使用

FMDV 3ABCC-II

样品稀释液

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

FMDV 3ABCC-III

FMDV 3ABCC阴性血清

300μl×1

500μl×1

1 ml×1

直接使用

FMDV 3ABCC-IV

FMDV 3ABCC阳性血清

300μl×1

500μl×1

1 ml×1

直接使用

WB-V

洗涤液20×

30ml×1

30ml×1

100ml×1

20倍稀释后使用

FMDV 3ABCC-VI

酶标抗体

5ml×1

10ml×1

25ml×1

直接使用

CA-VII

底物溶液A

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

CB-VIII

底物溶液B

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

SS-IX

终止液

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

【作用与用途】用于检测猪、牛、羊等动物血清或血浆中口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3ABC抗体,用于区分免疫和感染。

【用法与判定】1 用法

1.1  实验准备试剂盒各个组分在使用前均须恢复至室温(20~25℃),加液前充分摇匀。FMDV 3ABCC抗原包被板(I)上FMDV 3ABCC阴性血清(III)、FMDV 3ABCC阳性血清(IV)和样品的分布如图1所示(N-表示加阴性血清,P-表示加阳性血清,S1S2S3S4S5S6和其余孔表示加待检血清)。

酶标板上对照和样品添加模式图


1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

N

S5











B

N

S6











C

P












D

P












E

S1












F

S2












G

S3












H

S4












注:为保证不同样品的孵育时间一致,可先取待检样品不低于25μlFMDV 3ABCC阴性血清(III)、FMDV 3ABCC阳性血清(IV)不低于50μl分别加入96孔板(单独准备)中并做好记录,然后用多道移液器移至FMDV 3ABCC抗原包被板(I)相应孔中。也可在FMDV 3ABCC抗原包被板(I)直接加样。

1.2  操作步骤

1.2.1  每孔加入25μl样品稀释液(II),A1B1C1D1孔不加样品稀释液(II);

1.2.2  A1B1孔加入FMDV 3ABCC阴性血清(III)各50μl;在C1D1孔加入FMDV 3ABCC阳性血清(IV)各50μl;剩余孔加入25μl样品用于检测;

1.2.3  每孔加50μl的酶标抗体(VI),此时,反应体系为100μl

1.2.4  轻轻振匀孔中样品(勿溢出),37℃孵育30分钟;

1.2.5  将洗涤液20×V)用纯水或去离子水做20倍稀释,即为工作浓度的洗涤液;

1.2.6  甩干FMDV 3ABCC抗原包被板孔中的液体,每孔加入300μl工作浓度的洗涤液,洗涤3次,在洗涤和加入下一个试剂前,避免孔壁变干;

1.2.7  每孔加入50μl底物溶液AVII),每孔再加入50μl底物溶液BVIII);

1.2.8  室温下避光孵育10~15分钟;

1.2.9  每孔加入50μl的终止液(IX)终止显色反应;

1.2.10  使用酶标仪测定450nm波长处的OD值。

2结果判定

2.1  FMDV 3ABCC阴性血清(III)的平均OD值即为ODNCFMDV 3ABCC阳性血清(IV)的平均OD值即ODPC;样品的OD值即为ODS

2.2  阈值计算:阳性血清抑制率=(ODNC-ODPC)/ODNCx100%

样品抑制率=(ODNC-ODS)/ODNCx100%

2.3试验成立条件:ODNC值>0.6且阳性血清抑制率>60%,试验结果有效;否则重新进行试验。

2.4  判定:样品抑制率>50%判为阳性;样品抑制率≤50%判为阴性。

【注意事项】1)需自备的试验用器材:96孔板、100μl200μl的单道或多道微量移液器,吸头,酶标仪,纯水或去离子水。

2)底物溶液AVII)和底物溶液BVIII)避免接触氧化物,出现颜色变化,应弃之不用,底物溶液BVIII)应避光保存。

3)终止液(IX)为稀硫酸溶液,若接触到皮肤或眼睛,请及时用大量清水洗涤并就医。

4)需稀释的组分洗涤液20×V)在稀释时应准确量取,如果发现有结晶应加热使其溶解后使用。

5)本试剂盒贮藏时严禁冻结。

【规格】196/盒(2192/盒(3480/

【贮藏与有效期】 2~8℃保存,有效期12个月。

 

 

 

 

 

仅供兽医诊断使用


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