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口蹄疫病毒A型竞争ELISA抗体检测试剂盒

上市日期: 2017-06-08

【作用与用途】 用于检测猪、牛、羊等动物血清或血浆中A型口蹄疫病毒(FMDV)抗体。

 

口蹄疫病毒A型竞争ELISA抗体检测试剂盒说明书

兽用

兽药名称

通用名称:口蹄疫病毒A型竞争ELISA抗体检测试剂盒

商品名称:无

英文名称:Competitive ELISA Kit for Detecting Antibody of Foot and Mouth Disease Virus type A

汉语拼音:Koutiyibingdu A xing Jingzheng ELISA Kangti Jiance Shijihe

【主要成分与含量】

编号

试剂盒组分

数量

用法

1P

2P

5P

FMDV A C-I

FMDV A C抗原包被板

96孔板×1

96孔板×2

96孔板×5

直接使用

FMDV A C-II

样品稀释液

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

FMDV A C-III

FMDV A阴性血清

200μl×1

500μl×1

1 ml×1

直接使用

FMDV A C-IV

FMDV A阳性血清

200μl×1

500μl×1

1 ml×1

直接使用

WB-V

洗涤液20×

30ml×1

30ml×1

100ml×1

20倍稀释后使用

FMDV A C-VI

酶标抗体

5ml×1

10ml×1

25ml×1

直接使用

CA-VII

底物溶液A

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

CB-VIII

底物溶液B

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

SS-IX

终止液

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

【作用与用途】用于检测猪、牛、羊等动物血清或血浆中A型口蹄疫病毒(FMDV)抗体。

【用法与判定】

1、实验准备

1)为保证不同样品的孵育时间一致,可先取待检样品、FMDV A阴性血清(III)和FMDV A阳性血清(IV)不低于10μl分别加入96孔板(单独准备)中并做好记录,然后用多道移液器移至FMDV A C抗原包被板(I)相应孔中。也可在FMDV A C抗原包被板(I)直接加样。

2)试剂盒各个组分在使用前均须恢复至室温(20~25℃),加液前充分摇匀。

2、操作步骤

FMDV A C抗原包被板(I)上FMDV A阴性血清(III)、FMDV A阳性血清(IV)和样品的分布如图NPS所示


1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

N

S5











B

N












C

P












D

P












E

S1












F

S2












G

S3












H

S4












1)每孔加入40μl样品稀释液(II);

2)在A1B1孔加入FMDV A阴性血清(III)各10μl

3)在C1D1孔加入FMDV A阳性血清(IV)各10μl

4)剩余孔加入10μl样品用于检测;

5)每孔加50μl的酶标抗体(VI),即100μl的反应体系;

6)轻轻振匀孔中样品(勿溢出),37℃孵育30分钟;

7)将洗涤液20×V)用纯水或去离子水做20倍稀释,即为工作浓度的洗涤液

8)甩干FMDV A C抗原包被板孔中的液体,每孔加入300μl洗涤液,洗涤3次,在洗涤和加入下一个试剂前,避免孔壁变干;

9)每孔加入50μl底物溶液AVII);

10)每孔再加入50μl底物溶液BVIII);

11)室温下避光孵育10分钟;

12)每孔加入50μl的终止液(IX)终止显色反应;

13)使用酶标仪测定450nm波长处的OD值。

3、结果判定

1FMDV A阴性血清(III)的平均OD值即ODNC,应>0.5FMDV A阳性血清(IV)的平均OD值即ODPC,阳性血清抑制率应>50%,试验结果有效;否则重新进行试验;

2)样品的OD值即ODS

3)阈值计算: 阳性血清抑制率=(ODNC-ODPC)/ODNC x100%

              样品抑制率=(ODNC-ODS)/ODNC x100%

4)样品抑制率≥50%判为阳性;样品抑制率<50%判为阴性。

【注意事项】

1)需自备的试验用器材:96孔板、100μl200μl的单道或多道微量移液器,吸头,酶标仪,纯水或去离子水。

2)底物溶液AVII)和底物溶液BVIII)避免接触氧化物,出现颜色变化,应弃之不用,底物溶液BVIII)应避光保存。

3)终止液(IX)为稀硫酸溶液,避免接触氧化物,若接触到皮肤或眼睛,请及时用大量清水洗涤并就医。

4)需稀释的组分洗涤液20×V)在稀释时应准确量取,如果发现有结晶应加热使其溶解后使用。

5)在操作过程中,尽量避免将气泡加入检测孔中。

【规格】  196/ 2192/ 3480/

【贮藏与有效期】  2~8℃保存,有效期12个月。

【生产企业】

企业名称:青岛立见诊断技术发展中心

企业地址:青岛市城阳区红岛街道岙东南路21

邮编:266114

电话:0532-87839766

传真:0532-87839766

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