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牛结节性皮肤病病毒荧光PCR检测试剂盒

上市日期: 2019-12-24

牛结节性皮肤病病毒荧光PCR检测试剂盒说明书

兽用

【兽药名称】

通用名称:牛结节性皮肤病病毒荧光PCR检测试剂盒

商品名称:无

英文名称:Lumpy skin disease virus Real-time PCR rapid test kit

汉语拼音:Niujiejiexingpifubing Bingdu Yingguang PCR Jiance Shijihe

主要成分与含量

编号

试剂盒组分

50检份



LSDV 01-q

荧光PCR反应液

900μl/


LSDV 02-q

引物探针混合液

125μl/


LSDV -qPC

阳性对照

500μl/


NC

阴性对照

500μl/


作用与用途  用于牛的皮肤结节或结痂周围组织病料,唾液、口腔或鼻腔拭子、牛奶、精液,或者抗凝全血(EDTA抗凝)中的牛结节性皮肤病病毒核酸的检测。

用法与判定

1 用法

1.1 样品处理

采用DNA提取试剂盒或自动核酸提取仪提取各类样品中的待检DNA,低温保存。

1.2 扩增试剂准备  根据检测样品数量每个PCR反应管加入17.5 μl PCR反应液和2.5μl 引物探针混合液;先取5 μl阴性对照、再取5 μl待检DNA、最后取5 μl阳性对照(充分混匀)分别加到不同的PCR反应管中,加样结束后应盖紧PCR反应管,每个PCR反应管内液体的体积为25 μl

1.3 PCR反应  加样后将PCR反应管瞬时离心,然后置于荧光PCR仪内,进行如下反应:

1 50ºC预变性2分钟;2 95ºC变性5分钟,395ºC变性15秒,58ºC延伸60秒,共40个循环;设置58ºC收集FAM荧光信号。

2 判定

结果的有效性  阳性对照应出现特异性扩增曲线且Ct值≤35,且阴性对照无特异性扩增曲线或无Ct值,则试验成立;否则试验不成立。

结果判定  当样品的扩增结果有典型的扩增曲线且Ct值<40时可判定为牛结节性皮肤病病毒核酸阳性;当样品的扩增结果无Ct值时,判定为牛结节性皮肤病病毒核酸阴性。

注意事项

1 使用本试剂盒的实验室应严格按照国家有关规定进行管理。

2 PCR反应液对温度敏感容易失活,使用时应置于冰上,使用后应立即冻存,每盒反应液、引物探针混合液冻融次数不宜超过3次。

3 扩增试剂准备时应按阴性对照、待检核酸、阳性对照的顺序加入PCR反应管中。

4 吸取反应液时,应尽量避免产生气泡;加样结束后应盖紧反应管,以免液体蒸发造成结果不准确。

5 处理样品用器械及废弃物品应高压灭菌。检测过程中使用过的吸头,应直接打到盛有10% 84消毒液的带盖废物缸内。检测结束的PCR反应管,严禁开盖不得高压处理。

6 工作台及各种实验用品应定期清洁并用10% 84消毒液或紫外灯进行防污染处理。

7 各区域物品均为专用,不得交叉使用,以免污染。检测结束后,应立即对工作台进行清洁。

8 严禁使用超过有效期限的试剂;不同批号的试剂请勿混用。

【规格】  50检份/

【贮藏与有效期】  -20℃以下冷冻保存,有效期12个月。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

仅供兽医诊断使用


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