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病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒

上市日期: 2017-10-20

本试剂盒适用于动物体液、分泌物及组织中病毒核酸的提取,可同时提取样本中的DNARNA;提取的核酸可直接用于后续的PCRRT-PCR实验。


病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒

兽用

本试剂盒适用于动物体液、分泌物及组织中病毒核酸的提取,可同时提取样本中的DNARNA;提取的核酸可直接用于后续的PCRRT-PCR实验。

编号

 

 

 

25检份/

50检份/

NAE 01

消化液

13 ml×1

26 ml×1

室温

NAE 02

抑制物去除液

12.5 ml×1

25 ml×1

室温

NAE 03

漂洗液

5 ml×1

10 ml×1

室温(使用前加无水乙醇)

NAE 04

蛋白酶 K

500μl×1

1ml×1

2~8℃保存

NAE 05

Nuclease-free

14 ml×1

28 ml×1

室温

NAE 06

核酸吸附柱和收集管

25

50

室温

【保存期】  有效期12个月。

【规格】 125检份/ 250检份/

【使用方法】

1样品采集处理

1.1 血清、血浆和淋巴液等无细胞体液样本采集:

1.1.1血清采集:采集血液后应立即置于4℃冰箱中待血清析出。

1.1.2血浆采集:需用EDTA抗凝剂抗凝血分离。

1.2 拭子样本采集:采集拭子样本时采用专用拭子采集口咽分泌物、体液分泌物。

1.3 组织样本采集:气管、肺、喉头、脾脏、扁桃体、肾脏和淋巴结等。

1.3.1组织样品处理:选取病变明显的组织块剪取样品约20mg(可选择多部位剪碎混匀后再取,1粒大米重约20mg,组织取样量切忌太多,影响),依次加入150μl消化液、450μl Nuclease-free水和20μl蛋白酶K,用眼科剪反复多次剪碎混匀或用电动匀浆器匀浆,置56℃水浴中消化15~30分钟(视消化情况)后离心取上清。

2病毒DNA/RNA提取

2.1 取上述处理后样本离心取上清100μl转入1.5ml离心管,加入300μl消化液,立刻涡旋振荡充分混匀。室温(15~25)放置10分钟,期间振荡混匀一次;已消化过的组织上清不需放置10分钟,直接进入下面步骤。

2.2 加入250μl无水乙醇,立刻涡旋振荡充分混匀。环境温度高于25℃时无水乙醇需要冰上预冷后再加入。

2.3 将上述混合物加入一个核酸吸附柱中(吸附柱放入收集管中)8000rpm离心30秒,弃废液。

2.4 500μl抑制物去除液,8000rpm离心30秒,弃废液。

2.5 将漂洗液用无水乙醇做5倍稀释,即为工作浓度的漂洗液。

2.6 加入500μl工作浓度的漂洗液,8000rpm离心30秒,弃废液。

2.7再加入500μl工作浓度的漂洗液,8000rpm离心30秒,弃废液。

2.8 弃去收集管废液,13000rpm空柱离心3分钟,尽量除去漂洗液,以免漂洗液中残留乙醇抑制PCR反应。

2.9 取出核酸吸附柱,放入一个无核酸酶的离心管中,在吸附膜的中间部位加50μl Nuclease-free 水,室温放置1分钟,13000rpm离心1分钟。

2.10 离心管中所得液体即为检测所需的样本DNARNA。核酸提取完后请立即实验。如需短期保存,DNA病毒核酸可以存放可以放置在-20℃冰箱;RNA病毒核酸立刻短期放置在-70℃超低温冰箱。

【注意事项】

1、为保证实验结果准确,样品应为新鲜采集,2~8℃运输,不要反复冻融。

2、核酸提取时,应在温度稳定(15-25℃)、符合核酸提取净化通风条件的环境中进行。

3、漂洗液使用前确认添加无水乙醇。


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