产品中心 Products
产品名称:

小反刍兽疫病毒荧光RT-PCR检测试剂盒

上市日期: 2017-06-29

作用与用途】用于检测多种临床样本(如鼻腔/口腔拭子、眼拭子以及淋巴结、脾、肾、直肠、结肠、肺等组织)中是否含小反刍兽疫病毒核酸。


小反刍兽疫病毒荧光RT-PCR检测试剂盒

说明书(50头份)

 

组分与用法

编号

名称

装量

用法

保存条件

1

反应阳性对照

30 μl/ ×1

直接使用

-20°C保存

2

荧光RT-PCR反应液

1075 μl/ ×1

直接使用

-20°C保存

3

酶混合液

25 μl/ ×1

直接使用

-20°C保存

 

未提供但是需要准备的试剂和耗材

RNase的纯水。

RNase/DNase PCR反应管、Tips1.5ml离心管等。

 

作用与用途用于检测多种临床样本(如鼻腔/口腔拭子、眼拭子以及淋巴结、脾、肾、直肠、结肠、肺等组织)中是否含小反刍兽疫病毒核酸。

 

用法与判定

样本处理  可采用RNA纯化试剂盒手工提取或全自动核酸提取仪提取各类样本中的RNA。如在2小时内检测则提取的RNA置于冰上保存,否则置于﹣70ºC冰箱保存。

扩增试剂准备  配制反应体系前,务必使荧光RT-PCR反应液完全溶解,并颠倒混匀几次,然后瞬时离心。每份被检样品使用1PCR管,每管中依次加入:荧光RT-PCR反应液21.5 μl(含ROX参比荧光,可用于ABI 7500荧光PCR仪。其他荧光PCR仪无需要设置参比荧光),酶混合液0.5 μl,被检样品中提取的RNA溶液3 μl

每次检测需设置阳性对照和阴性对照(加3 μl)。阳性对照使用反应阳性对照品作为模板,阴性对照使用无RNA酶的纯水作为模板。

3  RT-PCR反应  加样后,将PCR管置于荧光PCR仪内进行如下反应:50ºC反转录15 min95ºC3 min;然后进行40个循环的PCR扩增,扩增条件为94ºC 15s60ºC 50s,在每个循环的第二步(60°C 50s)收集荧光信号,其中报告荧光为FAM

结果判断  阳性对照应出现特异性扩增曲线且Ct值小于35,阴性对照无Ct值且无特异性扩增曲线。

如果待测样品的Ct值小于等于30且有特异性扩增曲线则结果判为强阳性;若Ct值大于30小于37且有特异性扩增曲线则判为弱阳性;若Ct值大于等于37则判为阴性。

 

 

 

 

 

注意事项

使用本试剂盒的实验室,应严格按照国家有关部分颁布的有关基因扩增检验实验室管理规范进行管理。

各区域物品均为专用,不得交叉使用,以免污染。检测结束后,应立即对工作台进行清洁。

吸取反应液时,应尽量避免产生气泡。上PCR仪前,应注意检查各反应管是否盖紧,以免液体蒸发造成结果不准确。

检测过程中使用过的吸头,应直接打到盛有10%次氯酸的废物缸内,并与其他废弃物品一同灭菌后丢弃。

工作台及各种实验用品应定期用10%次氯酸、75%酒精或紫外灯进行消毒。

由于PPRVRNA病毒,在提取过程中应特别注意防止RNA的降解作用。

酶混合物容易失活,使用时应置于冰上,使用后应立即放回冰箱冻存。

试剂使用前应在常温下充分融化并混匀。

不同批号的试剂请勿混用,并在有效期内使用。

 

贮藏  保存于-20ºC,避免反复冻融。


Hot Products / 相关产品 More
 
犀牛云提供企业云服务
青岛立见诊断技术发展中心
邮箱:QDlijian2003@163.com
传真:0532-87839766 
地址:山东省青岛市红岛经济区红岛街道岙东南路21号中国动物卫生与流行病学中心红岛基地
电话:0532-87839766
传真:+86 0755-2788 8009
邮编:330520