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鸡新城疫血凝抑制试验抗原​

上市日期: 2017-03-22

 【批准文号】兽药生字(2012)150138082

抗原含有灭活的鸡新城疫病毒,血凝效价应≥ 1:512。阳性血清为鸡新城疫高免的SPF鸡血清, HI效价应 1:512。阴性血清为 SPF鸡血清。

鸡新城疫血凝抑制试验抗原、阳性血清与阴性血清说明书

兽用非处方药

【兽药名称】

通用名称:鸡新城疫血凝抑制试验抗原、阳性血清与阴性血清

商品名称:无

英文名称:Newcastle Disease Hemagglutination Inhibition Test AntigenPositive Sera and Negative Sera

汉语拼音:Ji Xinchengyi Xueningyizhishiyan KangyuanYangxingxueqing Yu Yinxingxueqing

【主要成分与含量】

抗原含有灭活的鸡新城疫病毒,血凝效价应≥1:512。阳性血清为鸡新城疫高免的SPF鸡血清,HI效价应≥1:512。阴性血清为SPF鸡血清。

【性状】

抗原为微黄色海绵状疏松团块,易与瓶壁脱离,加稀释液后迅速溶解;阳性血清和阴性血清均为微黄色海绵状疏松团块,易与瓶壁脱离,加稀释液后迅速溶解。

【作用与用途】用于血凝抑制试验检测鸡新城疫抗体。

【用法与判定】

血凝(HA)试验操作方法

1.1 V型微量反应板中,每孔加0.025ml PBS溶液。

1.2 1孔加入0.025ml抗原,依次作0.025ml的对倍稀释至第11孔;为精确计算血凝单位,病毒悬液开始需作一系列密集稀释,如1/31/41/51/6等。

1.3 每孔加0.025ml PBS溶液。

1.4 每孔加0.025ml 1%V/V)鸡红细胞悬液。

1.5 将反应板在振荡器上振荡1~2分钟或轻叩反应板混合反应物,室温(20~25℃)静置15~30分钟或2~8 45~60分钟,当对照孔的红细胞显著呈纽扣状时判定结果。

1.6 结果判定  将反应板倾斜60°,观察红细胞有无呈泪珠样流淌,完全无泪珠样流淌(100%凝集)的最高稀释倍数为血凝效价。表示1HA单位(HAU),再根据开始的稀释倍数精确计算血凝效价。

血凝抑制(HI)试验操作方法

2.1 根据HA测定的效价,计算配制4个血凝单位(4HAU)抗原。

2.2 反应板中每孔加入0.025ml PBS

2.3 1孔中加入0.025ml血清。

2.4 在反应板上将血清做横向0.025ml的对倍稀释,至第10孔。

2.5 在第1孔至第11孔中,每孔加入0.025ml4HAU抗原,室温下(20~25℃)静置30分钟或2~8 45~60分钟。

2.6 每孔加入0.025ml 1%V/V)的鸡红细胞悬液,轻晃混匀后,室温(20~25℃)静置20~40分钟或2~8 45~60分钟,当对照孔红细胞呈显著纽扣状时判定结果。

2.7 结果判定  以完全抑制4HAU抗原的最高血清稀释倍数判为该血清的HI效价。当阳性血清的HI效价与已知效价误差不超过1个滴度,阴性血清效价不高于1:4时,试验方可成立。被检样品HI效价≤1:4判为阴性;等于1:8判为可疑(可疑样品应重检,重检效价≥1:8判为阳性,<1:8判为阴性);≥1:16判为阳性。

【注意事项】

1HAHI试验影响因素甚多,应严格控制试验条件,准确控制红细胞悬液和抗原工作浓度,同时应严格控制温度和作用时间。

2)用pH7.0~7.2PBS作稀释液。

3)抗原和阴、阳性血清若有污染,应废弃。

4)使用时应先测抗原的血凝价,根据所测结果,配制4个血凝单位的抗原,配好后的抗原应在2小时内用完。

5)抗原开封后2~8℃保存,应不超过3个月。切忌反复冻融。

【规格】  抗原、阳性血清和阴性血清:(11ml/ 22ml/

【贮藏与有效期】  2~8℃保存,抗原、阳性血清和阴性血清有效期均为24个月。

【包装】 10/


 

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