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口蹄疫病毒荧光RT-PCR检测试剂盒说明书兽用【兽药名称】通用名称  口蹄疫病毒荧光RT-PCR检测试剂盒商品名称  无英文名称  Foot and Mouth Disease Virus Real-Time PCR Test Kit 汉语拼音  Koutiyibingdu Yingguang RT-PCR Jianceshijihe【主要成分与含量】编号试剂盒组分装量FMDV 01-qR50荧光RT-PCR反应液900μl/管FMDV 02-qR50RT-PCR酶混合液100μl/管FMDV 03-qR50阳性对照500µl/管NC阴性对照500μl/管【作用与用途】  用于动物舌、鼻、蹄水泡皮,O-P液、淋巴结、扁桃体、肌肉、脾脏、肾脏、肺脏等样品中口蹄疫病毒(FMDV)核酸的检测。【用法与判定】1 用法1.1 样品处理样品参照《口蹄疫病毒荧光RT-PCR检测方法》(GB/T 22915-2008)(www.qdregen.com下载中心)进行处理。使用核酸提取试剂盒则参照说明书处理样品。阳性对照及阴性对照无需提取核酸,直接使用。1.2 荧光RT-PCR反应体系的配制  每个反应体系25μl。在每个PCR反应管中依次加入18 μl 荧光RT-PCR反应液和2μl RT-PCR酶混合液,然后取5μl阴性对照、再取5μl PCR待检核酸、最后取5μl阳性对照分别加到不同的PCR反应管中,加样结束后应盖紧反应管,标记并做好记录。1.3 荧光RT-PCR反应  加样后将PCR反应管瞬时离心,然后置于荧光PCR仪内,进行如下反应:1) 50ºC反转录15分钟;2) 95ºC预变性30秒;3) 95ºC变性10秒,55ºC退火10秒,60ºC延伸20秒,...
鸡传染性支气管炎病毒荧光RT-PCR检测试剂盒说明书兽用本试剂盒适用于禽组织、分泌物和排泄物及组织样中鸡传染性支气管炎病毒(IBV)核酸的检测。编号名称装量编号名称装量IBV 01-q48IBV qRT-PCR mix48管/盒IBV 03-q48阳性对照20µLx8管/盒IBV 02-q48IBV qRT-PCR Buffer1000μlIBV 04-q48阴性对照1000μl【保存期】  -20℃冷冻保存,有效期12个月。【规格】 48检份/盒【使用方法】1、样品采集、处理和病毒核酸提取样品参照《鸡传染性支气管炎诊断技术》(GB/T 23197-2008)(www.qdregen.com下载中心)进行处理。使用核酸提取试剂盒则参照说明书处理样品。阳性对照在每个薄壁PCR反应管中加入20μl qRT-PCR Buffer复溶后直接使用,阴性对照与样品同步同样进行处理。2、qRT-PCR反应体系的配制每个反应体系20μl。在每个薄壁PCR反应管中加入18μl IBV qRT-PCR Buffer进行复溶,然后加入2μl样品RNA、阳性对照和阴性对照RNA,标记并做好记录。3、qRT-PCR反应程序的设置1)48 ℃ 10 min;2)94 ℃ 3 min;3)94℃ 10s,60℃ 30s,共40个循环;设置60℃收集FAM荧光信号。【结果判定】1)阳性对照的Ct值小于等于28.0,同时阴性对照无Ct值且无扩增曲线,实验结果成立。2)被检样品Ct值小于等于30.0,且出现扩增曲线,为鸡传染性支气管炎病毒核酸阳性;被检样品Ct值大于等于40.0,判定为阴性;被检样品Ct值大于30.0小于40.0为可疑,需重新提取核酸重复检测仍为可疑则判定为阳性。【注意事项】1、本试剂盒说明书未单独说明的事项,均参照《鸡传染性支气管炎诊断技术》(GB/T 23197-200...
 
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