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非洲猪瘟病毒荧光 PCR 检测试剂盒(一步法)

上市日期: 2022-06-16

非洲猪瘟病毒荧光PCR 检测试剂盒(一步法)说明书 

批准文号:154028911 兽用 

【兽药名称】 通用名 非洲猪瘟病毒荧光 PCR 检测试剂盒(一步法) 商品名 无 英文名 African Swine Fever Virus Real-time PCR Test KitOne-step) 汉语拼音 Feizhouzhuwenbingdu Yingguang PCR Jiance ShijiheYibufa

主要成分与含量】 编号 试剂盒组分 装量 用法 ASFV 01-qf50 缓冲液 B1 5ml/瓶 直接使用 ASFV 02-qf50 缓冲液 B2 5ml/瓶 直接使用 ASFV 03-qf50 PCR 反应液 900μl/管 直接使用 ASFV 04-qf50 阳性对照 1ml /管 直接使用 ASFV 05-qf50 阴性对照 1ml /管 直接使用 

【作用与用途】 用于全血、血清、血浆、淋巴结、脾脏、肾脏、扁桃体和肌肉等样品中的非 洲猪瘟病毒核酸的检测。 

【用法与判定】 用法 1.1 样品处理 1.1.1 全血、血清、血浆直接进行下一步试验。淋巴结、脾脏、肾脏、扁桃体、肌肉等组 织样品取 0.10.2g,置研钵充分研磨,加入 10 倍体积约 12ml 生理盐水,混匀;或置研磨 管中,加入 10 倍体积约 12ml 生理盐水及研磨珠,用组织研磨仪匀浆。以 5000 /分钟离心 分钟,留上清,即为组织匀浆液。 1.1.2 取 1.5ml 离心管加入 100μl 缓冲液 B1,每管分别加入 10μl 全血(EDTA 抗凝剂) 或 20μl 组织匀浆液、血清、血浆样品、阳性对照和阴性对照混匀。室温 分钟内涡旋混匀 3~ 次。 1.1.3 每管加入 100μl 缓冲液 B2,涡旋混匀,12000 /分钟离心 分钟,上清为待检核酸。 1.2 扩增试剂准备 取 18μl PCR 反应液至 PCR 反应管;依次分别加入 2μl 阴性对照、 样品和阳性对照待检核酸,盖紧管盖,每个反应管内反应体积为 20μl

网址:www.qdregen.com 电话:0532-87839766 邮箱:qdlijian2003@163.com 1.3 将 PCR 反应管瞬时离心,置荧光 PCR 仪内,进行如下反应: 195℃预变性 20 秒;295℃变性 10 秒,58℃延伸 20 秒,共 40 个循环;设置 58℃收 集 FAM 荧光信号。 判定 2.1 试验成立条件 阳性对照 Ct 值应<35 且出现特异性扩增曲线,阴性对照应无 Ct 值或 Ct 值≥40 且无特 异性扩增曲线,试验结果有效;否则应重新进行试验。 2.2 结果判定 样品 Ct 值≤37 且出现特异性扩增曲线,判为阳性;无 Ct 值且无特异性扩增曲线,判为 阴性;当 37Ct 值<40 时判为可疑,应重新提取样品核酸进行检测,若 Ct 值仍<40,则判 为阳性,若无 Ct 值且无特异性扩增曲线,判为阴性。 

【注意事项】 1)使用本试剂盒的实验室应严格按照国家有关规定进行管理。 2PCR 反应液对温度敏感容易失活,使用时应置于冰上,使用后应立即冻存,每盒反 应液冻融次数不宜超过 次。 3)缓冲液 B1B2 使用前融化恢复至室温并充分摇匀,融化恢复至室温的缓冲液 B1、 B2 可室温保存。 4)扩增试剂准备时应按阴性对照、待检核酸、阳性对照的顺序加入 PCR 反应管中。 5)吸取反应液时,应避免产生气泡;加样结束后应盖紧管盖,以免液体蒸发。 6)处理样品用器械及废弃物品应高压灭菌。检测过程中使用过的吸头,应直接打到盛 有 10% 84 消毒液的带盖废物缸内。检测结束的 PCR 反应管,严禁开盖不得高压处理。 7)工作台及各种实验用品应定期清洁并用 10% 84 消毒液或紫外灯进行防污染处理。 8)各区域物品均为专用,不得交叉使用,以免污染。检测结束后,应立即对工作台进 行清洁。 9)严禁使用超过有效期限的试剂;不同批号的试剂请勿混用。 

【规格】 110 检份/ 225 检份/ 350 检份/ 4100 检份/盒 

【贮藏与有效期】 -20℃以下冷冻保存,有效期 12 个月。 

仅供兽医诊断使用


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