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产品名称:

非洲猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒

上市日期: 2019-12-23

非洲猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒说明书

兽用

【兽药名称】

通用名称  非洲猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒

商品名称  

英文名称  African Swine Fever Virus Indirect ELISA Antibody Test Kit

汉语拼音  Feizhouzhuwen Bingdu Jianjie ELISA Kangti Jianceshijihe

【主要成分与含量】

编号

试剂盒组分

数量

用法

1P

2P

5P

ASFV I-I

ASFV I抗原包被板

96孔板×1

96孔板×2

96孔板×5

直接使用

ASFV I-III

ASFV阴性血清

200μl×1

400μl×1

1000μl×1

直接使用

ASFV I-IV

ASFV阳性血清

200μl×1

400μl×1

1000μl×1

直接使用

WB-V

洗涤液20×

30ml×1

30ml×2

100ml×1

20倍稀释后使用

ASFV I-VI

酶标抗体

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

CA-VII

底物溶液A

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

CB-VIII

底物溶液B

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

SS-IX

终止液

6ml×1

12ml×1

30ml×1

直接使用

【作用与用途】  用于检测猪血清中非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体。

【用法与判定】  用法

1.1  实验准备  试剂盒各个组分在使用前均须恢复至室温(20~25℃),加液前充分摇匀。ASFV I抗原包被板(I)上ASFV阴性血清(III)、

ASFV阳性血清(IV)和样品的分布如图1所示(N-表示加阴性血清,P-表示加阳性血清,S1S2S3S4S5S6和其余孔表示加待检血清)。

酶标板上对照和样品添加模式图


1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

N

S5











B

N

S6











C

P












D

P












E

S1












F

S2












G

S3












H

S4












注:为保证不同样品的孵育时间一致,可先取待检样品不低于50μlASFV阴性血清(III)、ASFV阳性血清(IV)不低于50μl分别加入96孔板(单独准备)

中并做好记录,然后用多道移液器移至ASFV I抗原包被板(I)相应孔中。也可在ASFV I抗原包被板(I)直接加样。

1.2  操作步骤

1.2.1  A1B1孔加入ASFV阴性血清(III)各50μl;在C1D1孔加入ASFV阳性血清(IV)各50μl

剩余孔加入50μl样品用于检测;

1.2.2  轻轻振匀孔中样品(勿溢出),37℃孵育20分钟;

1.2.3  将洗涤液20×V)用纯水或去离子水做20倍稀释,即为工作浓度的洗涤液;

1.2.4  甩干ASFV I抗原包被板孔中的液体,每孔加入300μl工作浓度的洗涤液,洗涤5次,在洗涤和加入下一个试剂前,避免孔壁变干;

1.2.5  每孔加入50μl的酶标抗体;37℃孵育20分钟;

1.2.6  甩干ASFV I抗原包被板孔中的液体,每孔加入300μl工作浓度的洗涤液,洗涤5次,在洗涤和加入下一个试剂前,避免孔壁变干;

1.2.7  每孔加入50μl底物溶液AVII),每孔再加入50μl底物溶液BVIII);

1.2.8  37避光孵育10~15分钟;

1.2.9  每孔加入50μl的终止液(IX)终止显色反应;

1.2.10  使用酶标仪测定450nm波长处的OD值。

结果判定

2.1  ASFV阴性血清(III)的平均OD值即ODNCASFV阳性血清(IV)的平均OD值即ODPC;样品的OD值称为ODS

2.2  Cut Off值(阈值)的计算:Cut Off=ODS-ODNC

2.3  试验成立条件:ODNC值≤0.15ODPC值≥0.6,试验结果有效;否则重新进行试验。

2.4  判定: Cut Off值≤0.15,结果判为阴性;Cut Off值>0.15,结果判为阳性。

【注意事项】  1)需自备的试验用器材:96孔板、100μl200μl的单道或多道微量移液器,吸头,酶标仪,纯水或去离子水。

2)底物溶液AVII)和底物溶液BVIII)避免接触氧化物,出现颜色变化,应弃之不用,底物溶液BVIII)应避光保存。

3)终止液(IX)为稀硫酸溶液,若接触到皮肤或眼睛,请及时用大量清水洗涤并就医。

4)需稀释的组分洗涤液20×V)在稀释时应准确量取,如果发现有结晶应加热使其溶解后使用。

5)本试剂盒贮藏时严禁冻结。

【规格】  196/ 2192/ 3480/

【贮藏与有效期】  2~8℃保存,有效期12个月。

 

 

 

 

仅供兽医诊断使用


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