检测产品 Products
产品名称:

非洲猪瘟病毒PCR检测试剂盒

上市日期: 2019-05-07

非洲猪瘟病毒PCR检测试剂盒说明书

兽用

【兽药名称】

通用名称:非洲猪瘟病毒PCR检测试剂盒

商品名称:无

英文名称:African swine fever virus PCRtest kit

汉语拼音:FeizhouzhuwenBingdu PCR JianceShijihe

主要成分与含量

编号

试剂盒组分

装量

25检份

50检份

ASFV 01-50

PCR反应液

450μl/

900μl/

ASFV-qPC

阳性对照

500μl/

500μl/

NC

阴性对照

500μl/

500μl/

作用与用途】用于猪血液、脾脏、淋巴结、肾脏组织样品中的非洲猪瘟病毒核酸的检测。

用法与判定

1 用法

1.1  样品采集及处理

1.1.1  活猪样品  无菌采集抗凝血或血清5 ml

1.1.2  病死猪剖检样品或屠宰场剖检样品  无菌采集死猪的脾、肺、肾、扁桃体、淋巴结、肌肉等组织样品。28℃低温运至实验室用于检测。

1.1.3  病猪污染的周边环境  采集与病猪相关场所的粪便、饲料、污水样品。28℃低温运至实验室用于检测。

1.2  样品处理方法

1.2.1  脾、肺、肾等组织样品处理方法  取适当大小的组织块放入盛有PBS缓冲液的研磨管中,6000 r/min震荡研磨45 s,制成约10%的组织匀浆液,5000 r/min离心5 min,取200μl上清液进行核酸提取。

1.2.2  粪便、饲料样品处理方法  取适量的粪便、饲料放入盛有PBS缓冲液的研磨管中,6000 r/min震荡研磨45 s,制成约10%的匀浆液,5000 r/min离心5 min,取200 μl上清液进行核酸提取。

1.2.3  污水样品处理方法  直接取200 μl污水进行核酸提取。

1.3  样品核酸提取  采用DNA纯化试剂盒或自动核酸提取仪提取各类样品中的核酸。低温保存待检。

1.2 扩增试剂准备

1.2.1 根据检测样品数量每个反应管加入18 μl PCR反应液,先取2μl阴性对照、再取2μl PCR待检核酸、最后取2 μl阳性对照(充分混匀)分别加到不同的PCR反应管中,加样结束后应盖紧反应管,每个反应管内液体的体积为20 μl

1.2.2 每次检测需设置阳性对照和阴性对照(加2 μl)。

1.3 PCR反应

加样后将PCR反应管瞬时离心,然后置于PCR仪内,进行如下反应:

195ºC 5分钟;295ºC变性15秒,62℃退火30秒,72℃延伸30秒,共35个循环;

372 ℃延伸7分钟。

1.4  PCR产物的电泳

PCR反应结束后,取PCR产物5 μl1.5%琼脂糖凝胶(含核酸染料)中进行电泳30分钟。电泳结束后,将琼脂糖凝胶置于凝胶成像系统中观察结果。

2 判定

结果的有效性  阳性对照出现260bp扩增条带,阴性对照无条带出现(引物二聚体除外)。

  结果判定  被检样品出现260bp扩增条带为病毒核酸阳性,否则为阴性。

注意事项1 PCR检测的每一步都应在专门区域或地点进行。

2 使用前应将PCR反应液、阴性对照和阳性对照完全溶化,充分振荡混匀,瞬时离心,尽量吸取液体上层。

3 试剂盒不同组分间不得交叉,防止污染。

4 避免反复冻融。

5 PCR产物均应合理处理,以免造成污染。

6 严格按照使用说明书进行操作。

7 按要求贮藏,冷链运输;并在有效期内使用。

【规格】125检份/盒(250检份/

【贮藏与有效期】-20℃以下冷冻保存,有效期12个月。

 

 

仅供兽医诊断使用


Hot Products / 相关产品 More
 
犀牛云提供企业云服务
青岛立见诊断技术发展中心
邮箱:QDlijian2003@163.com
传真:0532-87839766 
地址:山东省青岛市红岛经济区红岛街道岙东南路21号中国动物卫生与流行病学中心红岛基地
电话:0532-87839766
传真:+86 0755-2788 8009
邮编:330520