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非洲猪瘟病毒(ASFV II型)基因组DNA标准物质【标准物质编号】  GBW(E)091033【名称】  非洲猪瘟病毒(ASFVII型)基因组DNA标准物质【用途】  用于非洲猪瘟相关的实验室检测能力验证、产品质量检测、计量追溯、测量方法验证分析、仪器校准等方面。【特性】  本产品由中国动物卫生与流行病学中心国家非洲猪瘟参考实验室研制,为含有非洲猪瘟病毒(ASFV II型)全基因组DNA的标准物质。本标准物质候选物主要以非洲猪瘟病毒(ASFV II型)全基因组DNA为原料,经过DNA测序验证,DNA分子荧光定量方法测定ASFV II型基因组DNA浓度,采用数字PCR进行初步定值,加入适量的稳定剂后分装,最终经均匀性检验、稳定性检验、协作定值和不确定度评估后制备而成。【主要参数】  1 最小取样量  瓶内均匀性研究表明,本品在最小取样量为2μl时,瓶内均匀性标准偏差仍满足要求;2 稳定性  短期稳定性可在2~8℃条件下保存30天,长期稳定性可在-20℃以下保存12个月;3 定值  采用经校准验证的数字PCR方法,由10家实验室协作定值的方式测量标准物质的特性量值,特性值分布区间为0.73~2.45×103copies/μl;4 不确定度  扩展不确定度(k=2)为0.86×103 copies/μl。5 互换性  本品与从临床样品中获得的非洲猪瘟病毒全基因组DNA表现一致,无明显的基质效应,在实时荧光定量PCR、普通PCR和等温扩增方法间具有互换性。                   主要参数内容参数最小取样量大于等于2μl标准值1.59×103...
非洲猪瘟病毒双重(p72/CD2v基因)荧光定量PCR检测试剂盒说明书兽用【兽药名称】通用名称  非洲猪瘟病毒双重(p72/CD2v基因)荧光定量PCR检测试剂盒商品名称  无英文名称  African swine fever virus(p72/CD2v gene)Dual Real-Time PCR Test Kit 汉语拼音  Feizhouzhuwenbingdu Shuangchong(p72/CD2v Jiyin)YingguangdingliangPCR Jianceshijihe【主要成分与含量】编号试剂盒组分装量ASFV 01-qw/v50荧光PCR反应液625μl/管ASFV 02-qw/v50引物混合液375μl/管ASFV 03-qw/v50阳性对照500µl/管NC阴性对照500μl/管【作用与用途】  用于猪血液、脾脏、淋巴结、肾脏组织样品中的非洲猪瘟病毒p72基因和CD2v基因的检测。【用法与判定】1 用法1.1 样品处理采用DNA提取试剂盒或自动核酸提取仪提取各类样品中的待检DNA,低温保存。1.2 扩增试剂准备  根据检测样品数量计算配液量,每个PCR反应含有12.5μl 荧光PCR反应液和7.5μl引物混合液,吹打混匀后分装到PCR反应管中,每管20μl。依次取5 μl阴性对照、5 μl待检DNA和5 μl阳性对照(充分混匀)分别加到不同的PCR反应管中,加样结束后应盖紧PCR反应管,每个PCR反应管内液体的体积为25 μl。1.3 PCR反应  加样后将PCR反应管瞬时离心,然后置于荧光PCR仪内,进行如下反应:1) 95ºC预变性20秒;2) 95ºC变性10秒,58ºC延伸20秒,共40个循环;设置58ºC收集FA...
非洲猪瘟病毒双重(p72/MGF基因)荧光定量PCR检测试剂盒说明书兽用【兽药名称】通用名称  非洲猪瘟病毒双重(p72/MGF基因)荧光定量PCR检测试剂盒商品名称  无英文名称  African swine fever virus(p72/MGF gene)Dual Real-Time PCR Test Kit 汉语拼音  Feizhouzhuwenbingdu Shuangchong(p72/MGF Jiyin)YingguangdingliangPCR Jianceshijihe【主要成分与含量】编号试剂盒组分装量ASFV 01-qw/m50荧光PCR反应液625μl/管ASFV 02-qw/m50引物混合液375μl/管ASFV 03-qw/m50阳性对照500µl/管NC阴性对照500μl/管【作用与用途】  用于猪血液、脾脏、淋巴结、肾脏组织样品中的非洲猪瘟病毒p72基因和MGF基因的检测。【用法与判定】1 用法1.1 样品处理采用DNA提取试剂盒或自动核酸提取仪提取各类样品中的待检DNA,低温保存。1.2 扩增试剂准备  根据检测样品数量计算配液量,每个PCR反应含有12.5μl 荧光PCR反应液和7.5μl引物混合液,吹打混匀后分装到PCR反应管中,每管20μl。依次取5 μl阴性对照、5 μl待检DNA和5 μl阳性对照(充分混匀)分别加到不同的PCR反应管中,加样结束后应盖紧PCR反应管,每个PCR反应管内液体的体积为25 μl。1.3 PCR反应  加样后将PCR反应管瞬时离心,然后置于荧光PCR仪内,进行如下反应:1) 95ºC预变性20秒;2) 95ºC变性10秒,58ºC延伸20秒,共40个循环;设置58ºC收集FAM与VIC...
非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒说明书批准文号:兽药临字154028864                     兽用【兽药名称】通用名  非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒商品名  无英文名  African Swine Fever Virus Real-time PCR Detection Kit 汉语拼音  Feizhouzhuwenbingdu Yingguang PCR Jianceshijihe【主要成分与含量】组份规格荧光PCR酶混合液1000μl/管×1管引物探针1管阳性对照500 μl/管×1管阴性对照500 μl/管×1管说明书1份【作用与用途】  用于全血、血清、淋巴结、脾脏、肾脏、扁桃体、肺、肌肉、环境样品等样品中非洲猪瘟病毒核酸的检测。【用法与判定】1 用法1.1  样品采集及处理1.1.1  活猪样品  无菌采集抗凝血或血清5 ml。1.1.2  病死猪剖检样品或屠宰场剖检样品  无菌采集死猪的脾、肺、肾、扁桃体、淋巴结、肌肉等组织样品。2~8℃低温运至实验室用于检测。1.1.3  病猪污染的周边环境  采集与病猪相关场所的粪便、饲料、污水样品。2~8℃低温运至实验室用于检测。1.2  样品处理方法1.2.1  脾、肺、肾等组织样品处理方法  取适当大小的组织块放入盛有PBS缓冲液的研磨管中,6000 r/min震荡研磨45秒,制成约10%的组织匀浆液,5000 r/min...
非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒说明书批准文号:兽药临字154028864                     兽用【兽药名称】通用名  非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒商品名  无英文名  African Swine Fever Virus Real-time PCR Detection Kit 汉语拼音  Feizhouzhuwenbingdu Yingguang PCR Jianceshijihe【主要成分与含量】组份规格荧光PCR酶混合液1000μl/管×1管引物探针1管阳性对照500 μl/管×1管阴性对照500 μl/管×1管说明书1份【作用与用途】  用于全血、血清、淋巴结、脾脏、肾脏、扁桃体、肺、肌肉、环境样品等样品中非洲猪瘟病毒核酸的检测。【用法与判定】1 用法1.1  样品采集及处理1.1.1  活猪样品  无菌采集抗凝血或血清5 ml。1.1.2  病死猪剖检样品或屠宰场剖检样品  无菌采集死猪的脾、肺、肾、扁桃体、淋巴结、肌肉等组织样品。2~8℃低温运至实验室用于检测。1.1.3  病猪污染的周边环境  采集与病猪相关场所的粪便、饲料、污水样品。2~8℃低温运至实验室用于检测。1.2  样品处理方法1.2.1  脾、肺、肾等组织样品处理方法  取适当大小的组织块放入盛有PBS缓冲液的研磨管中,6000 r/min震荡研磨45秒,制成约10%的组织匀浆液,5000 r/min...
非洲猪瘟病毒荧光定量PCR快速检测试剂盒说明书兽用【兽药名称】通用名称:非洲猪瘟病毒荧光定量PCR快速检测试剂盒商品名称:无英文名称:African swine fever virus Real-time PCR rapid test kit 汉语拼音:Feizhouzhuwen Bingdu Yingguangdingliang PCR Kuaisu Jiance Shijihe【主要成分与含量】编号试剂盒组分装量50检份100检份ASFV B1-qf缓冲液B15ml/瓶10ml/瓶ASFV B2-qf缓冲液B25ml/瓶10ml/瓶E 01-q50酶反应液1000μl/管1000μl/管×2ASFV 02-qf50引物探针1管2管ASFV -qPC50阳性对照500μl/管500μl/管NC阴性对照500μl/管500μl/管【作用与用途】  用于猪血液、脾脏、淋巴结、肾脏组织样品中的非洲猪瘟病毒核酸的检测。【用法与判定】  1 用法1.1 样品处理1.1.1 全血、血清、血浆直接进行下一步试验。淋巴结、脾脏、肾脏、扁桃体、肌肉等组织样品取0.1~0.2g(黄豆粒大小)加入10倍体积约1~2ml生理盐水,采用不同方法制成组织匀浆液。1.1.2 根据待检样品数量,取1.5ml离心管依次加入100μl缓冲液B1(恢复至室温并混匀使用),然后再加入10μl全血(EDTA抗凝剂)或20μl组织匀浆液、血清、血浆样品混匀,室温3分钟内涡旋混匀3~5次。1.1.3 向上述混合液中加入100μl缓冲液B2(恢复至室温并混匀使用),涡旋混匀,12000转/分钟离心1分钟,上清为PCR待检核酸;如在2小时内检测则PCR待检核酸置于4℃保存,否则置于﹣20ºC以下保存。1.1.4 肉骨粉、血粉或环境样品等可使用病毒基因组提取试剂盒进行提取,然后再进行...
 
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